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产品名称:维生素B12 免疫亲和柱和检测试剂盒
产品型号:PriboFast
产品品牌:Pribo(普瑞邦)
产品价格:¥0

PriboFast维生素B12免疫亲和柱 

产品描述

免疫亲和柱可用于食品/饲料中维生素B12的萃取液的净化处理,性能稳定,操作简单快速。柱内含有维生素

 

B12抗体,以共价键形式粘附于凝胶颗粒上。

 

【仪器试剂】

仪 器

试 剂

天平、均质器、注射器、微量移液器、滤纸、铁夹子、漏斗、烧杯

甲醇100%、盐酸1N、

0.01M PBS、浓盐酸(36%)、氢氧化钠(1N)、双蒸水、1N Na2HPO4(液相用)

【样品准备】

所有水状溶液都可作为样品检测,但要确保其pH7±0.5,否则,先用1N盐酸或氢氧化钠调节pH。如果样品不清澈,需先离心,以免阻塞免疫亲和柱。

固体样品

1)一般的水溶性样品可以溶解后直接分析。将样品溶解于双蒸水后,调节pH7±0.5,注意要预先除去混浊物。

2)可以选择离心、过滤、Carrez试剂沉淀等方法净化样品。取样品溶液5ml分别加入250ul Carrez I 试剂和250ulCarrez II试剂,然后离心除去沉淀物。

3)难溶于冷水的样品,可通过温育加热使其溶解。

4)对于不溶性如谷物类样品,要先将样品进行粉碎成中细粒粉末,称取2g样品溶于10ml双蒸水中,振荡器上震荡30分钟(120/分)。也可用磁转子混匀。然后将溶液过滤或在3000转离心5分钟,调节pH7±0.5,然后用于过柱。

液体样品

1)对于高脂性样品奶油类,为分离脂肪,需先低温离心15分钟(2-8℃,3000转)。

2)除去脂肪层后直接将样品过柱。如果样品是高度粘稠,还需用0.01MPBS溶液进行稀释(按1:21:10的倍数)。

3) 富含蛋白样品需预先除去蛋白。每5ml样品中加入20ul浓盐酸(36),在60℃温育45分钟。然后离心10分钟(3000),用1N的盐酸调节pH7±0.5

10分钟(3000),用1N的盐酸调节pH7±0.5

【操作步骤】

1)每个样品需用一个新柱子;

2)将柱子和样品溶液处于室温;

3)取下免疫亲和柱的塞子,割下塞子上突出的部分,将这个不再密封的塞子放回柱子上;

4)将柱子与注射器连接,用铁夹子整个固定起来。柱子下面放一个烧杯。

5)将准备好的样品溶液加入注射器里,并取下柱底部的盖子。

6)样品溶液在重力下过柱;

7过完柱后用10ml蒸馏水到注射器清洗,过柱。水流过柱子后,用推杆让1-2倍的空气再经过柱子。

8)将干净的试管放在柱子底部。加1ml纯甲醇到(干的)注射器里,重力下通过柱子。如果甲醇过柱的速度慢,可以在过柱开始时用压力泵(尽量不要全程使用压力泵)。提取的时间不要少于1分钟。

9)让部分空气通过柱子,收集剩余的甲醇洗提液。

10)取50μl加到HPLC进样。

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